Pemindahan Embrio di Mares

We are searching data for your request:

Forums and discussions:

Manuals and reference books:

Data from registers:

Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Pemindahan embrio adalah teknik pembiakan yang dibantu oleh mana embrio dipindahkan dari rahim seorang donor kepada rahim seorang anak kuda penerima yang akan membawa kehamilan untuk jangka masa. Embrio biasanya didapatkan dari kuda penderma dengan lavage uterus (basuh) sekitar 6 hingga 8 hari selepas ovulasi. Embrio kemudiannya diletakkan di dalam rahim seorang mare penerima yang disegerakkan.

Kelebihan

Mare yang berharga boleh menghasilkan lebih daripada satu anak lembu setiap musim.

Mares boleh dalam persaingan sambil menghasilkan anak lembu.

Muda, kambing berharga secara genetik boleh mula menghasilkan anak lembu sebelum mencapai kematangan fizikal atau semasa dalam latihan.

Marak berumur tidak mampu membawa anaknya sendiri kerana patologi berdasarkan biopsi rahim boleh terus menghasilkan anak lembu.

Mares dengan ketidakupayaan fizikal yang menghalang kehamilan atau merembes seperti mengoyak otot perut atau patah tulang belakang lama masih dapat menghasilkan anak.

Kelemahan

Prosedurnya mahal.

Sekatan atau larangan dikuatkuasakan oleh sesetengah persatuan baka.

Melakukan pemindahan embrio di dalam mares memerlukan latihan khusus, dan karenanya tidak semua fasilitas kuda atau pengamal siap menawarkan layanan ini

Kejayaan prosedur ini bergantung pada keupayaan untuk mengawal salah satu faktor berikut:

Kesuburan yang melahirkan kuda penderma, yang tidak boleh dikawal. Tambahan pula, dalam banyak kes, subfertility adalah sebab mengapa beberapa kambing menjadi calon pemindahan embrio.

Kesuburan yang melampau dari jantan penerima. Kambing-kambing ini harus dipilih berdasarkan usia muda dan saluran pembiakan yang normal.

Pengurusan biri-biri atau masa pemakanan harus sesuai apabila melakukan pemindahan embrio.

Teknik pemulihan dan pemindahan embrio. Pengalaman doktor haiwan memainkan peranan penting dalam kejayaan prosedur ini.

Ijazah penyegerakan penderma dan penerima. Bayi penderma dan penerima disegerakkan dengan penggunaan hormon; Penyegerakan yang ketat adalah penting untuk memastikan embrio dipindahkan ke persekitaran rahim yang sesuai.

Peralatan untuk Pemindahan Embrio

Memulakan program pemindahan embrio memerlukan penubuhan makmal khusus. Peralatan pemindahan embrio tersedia secara komersil dari kebanyakan syarikat yang menjual bekalan pembiakan kuda. Selain peralatan biasa yang digunakan untuk pembiakan pembantu rutin, seperti mesin ultrasound, berikut diperlukan:

Foley catheters untuk membasahkan rahim penderma. Ini adalah sejenis kateter khas yang digunakan untuk mengalirkan rahim donor kuda untuk pemulihan embrio. Balon di hujungnya membolehkan katereter di serviks kuda, mencegah kehilangan cecair semasa prosedur pembilasan.

Tiub tambahan dan penyambung yang dilampirkan pada akhir kateter Foley untuk memperkenalkan dan menyingkirkan cecair dari rahim mare.

Penapis khas untuk memulihkan embrio daripada cecair pembilasan.

Mikroskop membedah untuk mencari embrio.

Hidangan budaya steril, pipet kaca kapilari, dan pelbagai peralatan makmal.

Medium pembersih yang paling biasa digunakan untuk pemindahan embrio adalah saline buffered fosfat Dulbecco (DPBS) yang ditambah dengan serum betina janin 10 peratus dan antibiotik. Media ini juga digunakan untuk mencuci dan memindahkan embrio ke rahim penerima. Medium ini boleh dibeli dalam bentuk cecair atau dalam serbuk dan dibentuk semula di makmal. Sebagai alternatif kepada DPBS, yang mahal, sesetengah pengamal menggunakan Lactated Ringers Solution sebaliknya.

Sebelum mencuba pemulihan embrio, semua peralatan dan media perlu disejukkan ke suhu badan dalam inkubator untuk mengelakkan kejutan sejuk pada embrio. Semua peralatan mestilah sama ada boleh guna atau dibasuh dengan betul dan disterilkan sebelum digunakan. Tiada detergen atau pembasmi kuman perlu digunakan untuk membasuh peralatan pemindahan embrio, kerana mereka mungkin meninggalkan sisa-sisa yang boleh menjejaskan daya maju embrio. Peralatan dibasuh dengan air paip panas sahaja dan kemudian dibasuh dengan air suling. Cateters, tiub dan penapis yang boleh digunakan semula hendaklah disterilkan sebelum digunakan.

Catheter Foley yang berasingan hendaklah dikhaskan untuk prosedur pemulihan embrio dan tidak bercampur dengan yang digunakan untuk membuang rahim rahim dengan jangkitan.

Memilih penerima untuk pemindahan embrio

Adalah berbaloi untuk melabur masa dan wang dalam memilih penerima yang optimum, kerana ia akan membazir untuk melabur sumber dan kepakaran dalam membiakkan kuda penderma dan memulihkan embrio dan kemudian meletakkannya di rahim seorang kuda yang tidak dapat membawa seekor anak terma. Oleh itu, semua rama yang dibeli dengan tujuan untuk menjadi penerima untuk program pemindahan embrio hendaklah dikemukakan kepada peperiksaan kesihatan yang lengkap. Semua kambing yang masuk ke program penerima harus melewati semua aspek BSE dan mempunyai endometrium yang sihat (lapisan rahim) apabila dinilai dalam sampel biopsi.

Usia penerima juga penting. Adalah lebih berkemungkinan bahawa mare yang matang tetapi agak muda (berusia antara 5 hingga 8 tahun) akan dapat membawa seekor anak kuda untuk jangka panjang. Selalunya, rama yang dibeli sebagai penerima diperoleh melalui lelongan awam dan umur tidak diketahui. Orang harus yakin tentang menilai usia dengan penilaian gigi.

Secara ideal, mares dalam program penerima harus dipilih mengikut saiz badan yang sama atau sedikit lebih besar dari saiz baka pembawa kuda. Adalah diketahui bahawa saiz kuda akan mempengaruhi saiz anak domba, tanpa mengira input genetik oleh penderma.

Akhirnya, adalah sangat berfaedah untuk memilih mares dengan kecenderungan yang baik, bukan sahaja kerana mereka akan menjadi lebih mudah untuk menangani sepanjang proses, tetapi juga kerana mereka boleh membuat ibu yang lebih baik. Dalam hal ini, mengetahui latar belakang kuda dan memilih kuda yang telah dilemparkan secara tidak sengaja pada masa lalu harus menjadi ideal. Bukan sahaja anda tahu dengan pasti bahawa kuda itu mampu membawa seekor anak kuda kepada istilah tetapi juga ibu kepada kuda. Malangnya, kecuali yang disediakan oleh pelanggan, masa lalu jantan penerima sering tidak diketahui.

Protokol Penyelarasan untuk Penderma dan Penerima

Banyak protokol penyegerakan untuk penderma dan penerima digunakan, bergantung pada pilihan peribadi dan pengalaman. Hormon diberikan kepada penderma dan penerima untuk memanipulasi kitaran estrus mereka dengan objektif bahawa mereka semua menjadi panas pada masa yang sama. Rawatan ini boleh berbeza-beza daripada pemberian jantan untuk satu pukulan prostaglandin, untuk meletakkan jantan dalam jadual rawatan penuh progesteron dan tangkapan estrogen.

Walaupun rumit, satu siri tangkapan progesteron / estrogen memberikan serasi terbaik antara penderma dan penerima. Secara ringkasnya, protokol ini terdiri daripada suntikan harian kombinasi progesteron dan estrogen selama 8 hingga 10 hari (150 mg progesteron ditambah 10 mg Estradiol-17b setiap tembakan). Ini menindas hormon-hormon sendiri kuda, dan apabila rawatan dihentikan, kebanyakan kura-kura harus panas dalam 3 hingga 5 hari. Kerana sesetengah ekor rahim boleh berovulasi semasa rawatan, pukulan prostaglandin biasanya diberikan pada akhir siri progesteron-estrogen untuk penyegerakan yang lebih baik.

Prostagens lisan yang dipasarkan untuk menjaga mares daripada haba tidak berfungsi juga untuk protokol penyegerakan.

Sebaik sahaja penderma dan penerima sedang panas dan kuda penderma dibiakkan kepada kuda jantan yang sesuai, ovulasi mungkin diinduksi di semua ekor dengan memberi mereka gonadotropin chorionic manusia. Ini akan memastikan serentak ovulasi yang lebih ketat antara penderma dan penerima. Seorang penerima adalah ideal jika dia bersalin pada hari yang sama atau satu hari selepas penderma. Penerima yang kurang bijak adalah orang-orang yang ovulasi sehari sebelum atau lebih jauh dari tarikh ovulasi penderma.

Malangnya, walaupun protokol penyegerakan terbaik boleh gagal dan penderma dan penerima tidak semestinya masuk ke dalam haba yang disegerakkan dan berovulasi seperti yang diharapkan. Ini adalah sebab yang baik untuk sentiasa ada lebih daripada satu penerima yang disediakan untuk setiap kuda penderma. Sekurang-kurangnya dua penerima setiap penderma disyorkan, tiga akan menjadi ideal.

Pengurusan Pembiakan Donor Mare

Faktor pembatas pertama untuk kejayaan program pemindahan embrio ialah kuda penderma mesti hamil. Oleh itu, penting untuk mengamalkan pengurusan pembiakan yang baik bagi kuda penderma.

Muda penderma boleh dibiakkan dengan air mani segar atau yang disejukkan. Adalah penting bahawa air mani adalah berkualiti dan stallion mempunyai kadar kehamilan yang baik. Jelas sekali, kuda betina yang ideal untuk kuda tidak selalunya dipilih berkaitan dengan potensi kesuburannya. Bagaimanapun, stallions lama dan subfertil harus dielakkan untuk mencegah memperkenalkan satu lagi faktor yang boleh menghalang kejayaan program pemindahan embrio. Atas sebab yang sama, penggunaan air mani yang dibekukan perlu dielakkan.

Pengurusan pembiakan optimum terdiri daripada pembiakan kuda semasa estrus yang hampir dengan ovulasi yang mungkin. Sebaiknya, saluran pembiakan dan penerima pembiakan perlu diperiksa setiap hari oleh palpation dan ultrasonography per rektum untuk menentukan masa yang optimum untuk pembiakan penderma dan menilai serentak dengan penerima.

Sekitar pembiakan, penderma mesti diberikan suntikan gonadotropin chorionic manusia untuk mendorong ovulasi, dan penerima diperlakukan dengan cara yang sama (tetapi tidak dibesarkan) untuk penyegerakan ovulasi yang lebih ketat.

Ovulasi mestilah disahkan oleh peperiksaan ultrasound. Hari ovulasi dianggap 'hari 0' dan uterus donor kambing biasanya diminum pada hari 7 selepas ovulasi.

Prosedur Pengumpulan Embrio

Pemulihan embrio dari kuda penderma biasanya dilakukan pada hari 7 pasca perundingan. Pertama, kuda diperiksa oleh palpation dan ultrasonography per rektum untuk menentukan nada dan rupa rahim. Kuda yang hamil kemungkinan besar mempunyai rahim yang sangat kencang, homogen, serviks tertutup, dan tidak ada cecair dalam rahim seperti yang digambarkan dengan ultrasound. Pada masa ini, embrio terlalu kecil untuk dilihat pada ultrasound.

Mare ini disediakan untuk pemulihan embrio dengan membersihkan kawasan perineal (vulva, anus dan punggung) dengan gosok povidone (Betadine) tiga kali, dan bilas dengan air selepas setiap gosok. Selepas pembilasan yang murah hati, kawasan itu dikeringkan dengan tuala kertas yang bersih.

Orang yang melakukan pemulihan pemindahan embrio hendaklah memakai lengan palpation yang bersih dan sarung tangan steril, dan jeli yang berasaskan air, hendaklah digunakan untuk pelinciran. Satu tangan diperkenalkan dalam vagina kuda untuk melewati kateter Foley melalui serviks dan ke dalam rahim. Kemudian, belon kateter itu dinaikkan dengan udara, dengan menggunakan picagari kecil, dan dengan demikian selamat dimasukkan ke dalam serviks untuk mengelakkan kehilangan cairan semasa siram rahim.

Ia memerlukan sekurang-kurangnya dua orang untuk melakukan prosedur pengumpulan embrio, satu memegang kateter dalam saluran kuda, dan seorang pembantu membantu penyisipan cairan dan pemulihan. Satu liter cecair disambungkan ke rahim mare oleh graviti, kemudian pulih ke silinder kaca besar, atau langsung melalui penapis untuk memerangkap embrio. Ini diulang tiga kali.

Sesetengah cecair perlu disimpan dalam penapis pemulihan, untuk mengelakkan pengeringan daripada embrio. Apabila prosedur pemulihan selesai, cecair di dalam penuras disehatkan ke dalam hidangan Petri. Mencari embrio dilakukan di bawah pembesaran dengan mikroskop membelah.

Prosedur Pemindahan Embrio

Sekiranya pemulihan dilakukan pada hari 7 postovulasi, embrio perlu berada di peringkat blastokis dan mudah digambarkan di bawah mikroskop membedah oleh pengendali yang berpengalaman.

Setelah dijumpai, embrio dibasuh dalam DPBS steril dengan serum betina janin 10 peratus. Embrio boleh dikendalikan dengan 0.25 ml semen pembekuan air mani Perancis atau pipet kaca yang disambungkan kepada bola getah atau tembikar tuberculin kecil.

Embrio biasanya dipindahkan secara transcervically, iaitu, melalui serviks kuda seolah-olah melakukan inseminasi buatan. Untuk tujuan ini:

Penerima yang dipilih bersedia untuk dipindahkan dengan membungkus dan mengikat ekornya. Rahimnya mesti diperiksa untuk nada dan bukti cecair. Embrio tidak boleh dipindahkan ke kuda yang mempunyai cecair di dalam rahim.

Kemudian, kawasan perineal dari kuda penerima dibersihkan sepenuhnya seperti yang dijelaskan untuk penderma.

Embrio boleh dimuatkan ke dalam pipet pereputan yang disambungkan ke jarum Tudung Udara 5-ml. Sekitar 1-ml udara dimuatkan ke dalam picagari terlebih dahulu, kemudian pipet itu dimuatkan dengan tiga kantong kecil yang dipisahkan oleh poket udara, dengan poket bendalir di tengah yang mengandung embrio.

Orang yang melaksanakan prosedur pemindahan hendaklah memakai sarung tangan steril pembedahan melalui lengan plastik panjang bahu yang bersih. Pipet dimasukkan ke dalam vagina dan dengan teliti melalui serviks. Sebaik sahaja masuk ke dalam badan rahim, penahan jarum suntik ditolak ke hadapan dan embrio disuntik ke dalam rahim.

Mare penerima harus diperiksa untuk kehamilan sekitar 7 hari selepas pemindahan.

Satu lagi kemungkinan adalah melakukan pemindahan embrio pembedahan. Ini dilakukan dengan penerima sedasi dalam kedudukan berdiri melalui sayap sayap yang membolehkan eksteriorisasi tanduk rahim. Tidak ada kelebihan jelas dalam memindahkan pembedahan embrio, dan prosedurnya lebih traumatik untuk kuda penerima.

Dalam sesetengah kes, pemilik atau pengamal yang melaksanakan pemindahan embrio memilih untuk tidak mempunyai penerima embrio untuk kuda penderma tertentu. Ini mengelakkan kerumitan membeli, memeriksa dan mengekalkan penerima, serta perbelanjaan dan kerja yang terlibat dengan penyegerakan. Dalam kes ini, embrio pulih boleh dihantar ke kemudahan rujukan yang memegang banyak penerima yang tersedia untuk dipindahkan pada bila-bila masa. Kelemahan alternatif ini adalah risiko yang terlibat dengan penghantaran embrio dan juga bahawa kadar kehamilan mungkin sedikit berkurangan apabila embrio tidak dipindahkan segera selepas pengumpulan.

Untuk penghantaran, embrio dibungkus ke dalam botol steril yang mengandungi medium yang dikomersialkan, Hams F-10, yang disumbat oleh penyebarannya dengan campuran 90 peratus nitrogen, 5 peratus oksigen dan 5 peratus karbon dioksida. Medium yang disediakan boleh dipesan dari kemudahan pemindahan sebelum melakukan prosedur pemulihan embrio. Media ini juga disertakan dengan serum betina dan antibiotik janin.

Setelah dikumpulkan dan dibasuh, embrio dimasukkan ke dalam botol plastik steril 3 ml yang mengandungi medium panas yang disesuaikan, dan ini kemudiannya dimasukkan ke dalam medium 50-ml yang mengandungi tiub centrifuge, sebagai langkah berjaga-jaga.

Tiub 50 ml dibungkus ke Equitainer untuk penghantaran sejuk.

Embrio yang dikemas hendaklah dihantar oleh syarikat penerbangan atau perkhidmatan kurier semalaman, dan dipindahkan sebaik sahaja ia sampai ke kemudahan pemindahan, secara optimum sebelum 24 jam selepas pengembalian.